Стерилизация в индустриални условия. Стерилизация при висока температура


Стерилизацията е процесът на унищожаване на всички видове микробна флора, включително техните форми на спори и вируси с помощта на физически или химични въздействия. Едно медицинско изделие се счита за стерилно, ако вероятността за неговото бионатоварване е равна или по-малка от 10 на степен -6. На стерилизация трябва да се подлагат медицински изделия, които влизат в контакт с кръвта на пациента, контактуват с повърхността на раната и влизат в контакт с лигавицата и могат да причинят нарушение на нейната цялост. Стерилизацията е сложен процес успешно изпълнениекоето изисква следните изисквания:

Ефективно почистване;

Подходящи опаковъчни материали;

Спазване на правилата за опаковане на медицински изделия;

Спазване на правилата за зареждане на стерилизатора с опаковки от медицински изделия;

Адекватно качество и количество на материала за стерилизация; правилна работа на оборудването;

Спазване на правилата за съхранение, обработка и транспортиране на стерилизиран материал.

Процесът на стерилизация на медицински инструменти и продукти от края на операцията до стерилно съхранение или следваща употреба включва изпълнение на дейности в определена последователност. Всички стъпки трябва да се спазват стриктно, за да се осигури стерилност и дълъг живот на инструментите. Схематично това може да се представи по следния начин:

Оставете инструментите настрана след употреба Дезинфекция -> Механично почистване на инструмента -> Проверете за повреди -> Изплакнете инструментите Изсушаване -> Опаковайте в опаковка за стерилизация -> Стерилизация -> Стерилно съхранение/използване. При използване на стерилизационна опаковка (хартия, фолио или контейнери за стерилизация), инструментите могат да се съхраняват стерилни и по-късно да се използват от 24 часа до 6 месеца.

В лечебните заведения се използват няколко форми на организация на стерилизация: децентрализирана, централизирана, извършвана в CSO и смесена. В извънболничната дентална практика по-често се използва децентрализирана стерилизация (особено в частни клиники). Централизираната стерилизация е характерна за районните стоматологични клиники и големите частни клиники. Децентрализираната стерилизация има редица съществени недостатъци, които влияят на нейната ефективност. Предстерилизационната обработка на продуктите най-често се извършва ръчно, а качеството на почистващите продукти е ниско. Трудно е да се контролира спазването на технологията за стерилизация, правилата за опаковане, зареждането на продуктите в стерилизатори и ефективността на работата на оборудването в условия на децентрализирана стерилизация. Всичко това води до намаляване на качеството на стерилизация. При използване на централизирана форма на стерилизация е възможно да се постигнат по-високи резултати от стерилизация чрез подобряване на съществуващите и въвеждане на най-новите методистерилизация (механизация на измиване на инструменти и медицински продукти, улесняване работата на парамедицинския персонал и др.). В централизираното стерилизационно отделение има: измиване, дезинфекция, пакетиране и отделение за стерилизация и разделно съхранение на стерилни изделия. Температурата на въздуха във всички отделения трябва да бъде между 18°C ​​и 22°C, относителна влажност- 35-70%, посока на въздушния поток - от чисти към относително замърсени зони.

Методи за стерилизация

Стерилизацията се извършва чрез физични методи: пара, въздух, гласперлен (в среда на нагрети стъклени перли), радиация, с помощта на инфрачервено лъчение и химични методи: разтвори химикалии газове (Таблица 3). AT последните годиниизползват се озон (стерилизатор S0-01-SPB) и плазмена стерилизация (инсталация Sterrad), използват се инсталации на базата на етиленов оксид, пари на формалдехид. Изборът на метод за стерилизация на продуктите зависи от тяхната устойчивост на методи на излагане на стерилизация.

Предимства и недостатъци различни методистерилизация са представени в таблицата.

Таблица.

Всички продукти преди стерилизация се подлагат на предстерилизационно почистване.

Когато се стерилизират чрез физически методи (пара, въздух), продуктите като правило се стерилизират, опаковани в опаковъчни материали, които са разрешени в съответствие с установената процедура за промишлено производство и употреба в Русия. При парния метод могат да се използват стерилизационни кутии без филтри и с филтър. С въздушния метод, както и с парни и газови методи, е разрешена стерилизация на инструменти в неопакована форма.

Метод за стерилизация с пара

С парния метод се стерилизират медицински продукти, части от инструменти и апарати от устойчиви на корозия метали, стъкло, хирургическо бельо, превързочни материали и конци, гумени изделия (катетри, сонди, тръби), латекс и пластмаси. При метода с пара стерилизиращият агент е наситена водна пара под свръхналягане от 0,05 MPa (0,5 kgf / cm2) - 0,21 MPa (2,1 kgf / cm2) (1,1-2,0 бара) с температура 110-134°C. Процесът на стерилизация се извършва в стерилизатори (автоклави). Пълният цикъл е от 5 до 180 минути (таблица). Според GOST 17726-81 името на този клас устройства е "Парен стерилизатор". Въпреки факта, че обработката с пара е доста ефективна, тя не винаги може да гарантира стерилизацията на инструмента. Причината за това е, че въздушните джобове в стерилизираните предмети могат да действат като термичен изолатор, като зъболекарски турбинни накрайници. За да решат този проблем, автоклавите използват функцията за създаване на предварителен вакуум импулсен режим. Предимствата на метода са кратък цикъл, възможност за стерилизиране на продукти, които не са устойчиви на топлина, използване на различни видове опаковки. Недостатъкът е високата цена на оборудването.

Таблица.


Метод на въздушна стерилизация

Стерилизацията с въздушен метод се извършва със сух горещ въздух при температура 160 °, 180 ° и 200 ° C (таблица).

Таблица.

Въздушният метод стерилизира медицински изделия, части от инструменти и апарати, изработени от устойчиви на корозия метали, чаши с маркировка 200 ° C, изделия от силиконов каучук. Преди въздушна стерилизация, продуктите се подлагат на предстерилизационно почистване и трябва да се изсушат в пещ при температура 85 ° C, докато видимата влага изчезне. Пълният цикъл е до 150 минути. Предимството на стерилизацията с горещ въздух в сравнение с метода с пара е ниската цена на оборудването. Недостатъците са: дълъг пълен цикъл на стерилизация (най-малко 30 минути), риск от повреда на инструментите от високи температури, невъзможност за стерилизиране на тъкани и пластмаси, само един контролен параметър - температура, високи енергийни разходи.

Гласперленова стерилизация

Стерилизацията с гласперлен се извършва в стерилизатори, стерилизиращият агент в които е среда от нагрети стъклени перли при работна температура 190-330°C. По време на стерилизация сухите инструменти се поставят в среда от горещи стъклени перли на дълбочина повече от 15 mm. Този метод може да стерилизира само инструменти, чийто размер не надвишава 52 mm, те трябва да бъдат напълно потопени в камерата за 20-180 секунди, в зависимост от размера. След стерилизация продуктите се използват веднага по предназначение. Високата работна температура и невъзможността за пълно потапяне на инструментите в стерилизиращата среда ограничават стерилизацията на широка гама медицински изделия.

Стерилизация по газов метод

За метода на газова стерилизация се използва смес от етиленов оксид и метилбромид в тегловно съотношение съответно 1: 2,5 (OB), етиленов оксид, парен разтвор на формалдехид в етилов алкохол и озон. Стерилизация със смес от ОБ и етиленов оксид се извършва при температура най-малко 18 ° C, 35 ° C и 55 ° C, пари от разтвор на формалдехид в етанол при температура 80 ° C. Преди газова стерилизация продуктите след предстерилизационно почистване се изсушават до изчезване на видимата влага. Отстраняването на влагата от кухините на продуктите се извършва с помощта на централизиран вакуум, а в негово отсъствие с помощта на водоструйна помпа, свързана към кран за вода. По време на стерилизация с ОВ и етиленов оксид въздухът се отстранява до налягане от 0,9 kgf/cm2. При използване на преносимо устройство, след приключване на стерилизацията, то се съхранява в него аспираторза 5 часа.

Озонът, произведен в озоновия стерилизатор S0-01-SPB, стерилизира продукти с проста конфигурация, изработени от устойчиви на корозия стомани и сплави, разопаковани при температура не по-висока от 40 ° C. Цикълът на стерилизация (достъп до режим, стерилизация, обеззаразяване) е 90 минути. След стерилизация инструментите се използват веднага по предназначение без допълнителна вентилация. Периодът на запазване на стерилността на продуктите е 6 часа, при спазване на правилата за асептика. При опаковане в стерилна двуслойна памучна тъкан срокът на стерилност е 3 дни, а при съхранение в камера с бактерицидни облъчватели- 7 дни.

В Русия е регистрирана единствената единица - газовият стерилизатор на компанията "Münchener Medical Mechanic GmbH", използващ формалдехидни пари, препоръчван за стерилизиране на проблемно оборудване.

инфрачервено излагане

Новите методи за стерилизация са отразени в инфрачервения стерилизатор за стерилизация, предназначен за стерилизационна обработка на метални медицински инструменти в стоматологията, микрохирургията, офталмологията и други области на медицината.

Високата ефективност на IR стерилизиращия ефект осигурява пълното унищожаване на всички изследвани микроорганизми, включително като: S. epidermidis, S. aureus, S. sarina flava, Citrobacter diversus, Str. пневмония, Bacillus cereus.

Бърз, в рамките на 30 секунди, достъп до режим 200±3°С, кратък цикъл на стерилизационна обработка - от 1 до 10 минути, в зависимост от избрания режим, заедно с ниска консумация на енергия, са несравними по ефективност с нито един от използваните методи. досега стерилизация. IR стерилизаторът за стерилизация е лесен за работа, не изисква специално обучени оператори, а самият метод принадлежи към екологично чиста технология. За разлика от стерилизацията с пара, въздух или гласперлен, инфрачервената стерилизация не атакува режещия инструмент със стерилизиращ агент (инфрачервено лъчение).

йонизиращо лъчение

Активните агенти са гама лъчи. В лечебните заведения йонизиращото лъчение не се използва за дезинфекция. Използва се за стерилизиране на продукти за еднократна употреба във фабрично производство.

Този метод се използва за стерилизиране на устройства, чиито материали не са термично стабилни и не могат да се използват други официално препоръчани методи. Недостатъкът на този метод е, че продуктите не могат да се стерилизират в опаковката и след стерилизация трябва да се измият със стерилна течност (вода или 0,9% разтвор на натриев хлорид), което при нарушаване на правилата за асептика може да доведе до вторично замърсяване на стерилизирани продукти с микроорганизми. За химикали се използват стерилни контейнери от стъкло, топлоустойчиви пластмаси, които могат да издържат на стерилизация с пара, и емайлирани метали. Температурата на разтворите, с изключение на специални режими за използване на водороден прекис и лизоформин 3000, трябва да бъде най-малко 20 ° C за съдържащи алдехид средства и най-малко 18 ° C за други средства (таблица).

Таблица.

Химическият метод на стерилизация се използва широко за обработка на "проблемно оборудване", например за оборудване с оптични влакна, оборудване за анестезия, пейсмейкъри и зъболекарски инструменти. Такива модерни стерилизиращи агенти като глутаралдехид, производни на ортофталова и янтарна киселина, кислородсъдържащи съединения и производни на пероцетна киселина се използват в режимите на експресна стерилизация и "Класическа стерилизация". Лекарствата, получени от тях, се считат за обещаващи - Erigid Forte, Lysoformin-3000, Sidex, NU Sidex, Sidex OPA, Gigasept, Steranios, Secusept Active, Secusept Pulver ”, “Anioxide 1000”, “Clindesin forte”, “Clindesine oxy”, и обобщавайки икономическата обосновка за употребата на тези лекарства, трябва да се заключи, че те са неравностойни, което се определя от времето на използване на работните разтвори (например от всички лекарства само „Erigid forte“ има възможност използване на работния разтвор за 30 дни за "класическа" стерилизация).

Разглобяемите продукти се стерилизират несглобени. За да се избегне нарушаване на концентрацията на стерилизиращите разтвори, потопените в тях продукти трябва да са сухи. Цикълът на обработка е 240-300 минути, което е съществен недостатък на метода. В допълнение, недостатъкът е високата цена на дезинфектантите. Предимството е, че няма специално оборудване. Измитите стерилни продукти след отстраняване на течността от каналите и кухините се използват незабавно по предназначение или след опаковане в двуслоен стерилен памучен калико, поставени в стерилна кутия, облицована със стерилен чаршаф за период от не повече от 3 дни. .

Цялата работа по стерилизацията на продуктите се извършва при асептични условия в специални помещения, подготвени като операционен блок (кварциране, пролетно почистване). Персоналът използва стерилни гащеризони, ръкавици, очила. Изплакването на продуктите се извършва в 2-3 смени на стерилна вода, всяка по 5 минути.

Контрол на ефективността на стерилизацията

Ефективността на стерилизацията се контролира чрез физични, химични и бактериологични методи.

Физическите методи за контрол включват: измерване на температура, налягане и време на прилагане на стерилизацията.

В продължение на десетилетия химикали са били използвани за химически контрол, които имат точка на топене, близка до температурата на стерилизация. Тези вещества са: бензоена киселина - за парна стерилизация; захароза, хидрохинон и някои други - за контрол на въздушната стерилизация. Ако има стопяване и обезцветяване на тези вещества, тогава резултатът от стерилизацията се счита за задоволителен. Тъй като използването на горните индикатори не е достатъчно надеждно, химическите индикатори вече са въведени в практиката за контрол на методите за термична стерилизация, чийто цвят се променя под въздействието на температура, подходяща за определен режим за определено време, необходимо за прилагане този режим. По промяна на цвета на индикаторите се съди за основните параметри на стерилизацията - температурата и продължителността на стерилизацията. От 2002 г. GOST RISO 11140-1 „Стерилизация на медицински продукти. Химични индикатори. Общи изисквания“, в който химичните индикатори са разделени на шест класа:

Да се 1 класпоказатели за външни и вътрешен процес, които се поставят върху външната повърхност на опаковката с медицински изделия или вътре в комплекти инструменти и хирургическо бельо. Промяна в цвета на индикатора показва, че опаковката е преминала процес на стерилизация.

Co. 2 класвключват индикатори, които не контролират параметрите на стерилизация, но са предназначени за използване при специални тестове, например въз основа на такива индикатори те оценяват ефективността на вакуумната помпа и наличието на въздух в камерата на парния стерилизатор.

Да се 3 класвключват индикатори, които определят един параметър на стерилизация, например минималната температура. Те обаче не дават информация за времето на излагане на температура.

Да се 4 класвключват многопараметрични индикатори, които променят цвета си, когато са изложени на няколко параметъра на стерилизация. Пример за такива индикатори са индикаторите за парна и въздушна стерилизация за еднократна употреба IKPVS-"Medtest".

Да се 5 класвключват интегриращи индикатори, които отговарят на всички критични параметри на метода на стерилизация.

Да се 6 класвключват индикатори-емулатори. Индикаторите са калибрирани според параметрите на режимите на стерилизация, в които се използват. Тези показатели отговарят на всички критични параметри на метода на стерилизация. Емулиращите индикатори са най-модерните. Те ясно регистрират качеството на стерилизация с правилното съотношение на всички параметри - температура, наситена пара, време. Ако някой от критичните параметри не е спазен, индикаторът не работи. Сред битовите индикатори за термовреме, индикатори "IS-120", "IS-132", "IS-160", "IS-180" на фирма "Vinar" или индикатори за пара ("IKPS-120/45", " IKPS-132 / 20") и въздушна ("IKPVS-180/60" и "IKVS-160/150") стерилизация за еднократна употреба IKVS на компанията Medtest.

Основни правила за използване на индикатори за стерилизация на пара и въздух за еднократна употреба ИКПВС-"Медтест"

Всички операции с индикатори - екстракция, оценка на резултатите - се извършват от персонал, извършващ стерилизация.

Оценката и отчитането на резултатите от контрола се извършва чрез оценка на промените в цвета на първоначалното състояние на термоиндикаторния етикет на всеки индикатор, сравнявайки с цветния етикет на стандарта за сравнение.

Ако цветът на крайното състояние на етикета на термичния индикатор на всички индикатори съответства на цветния етикет на стандарта за сравнение, това показва, че необходимите стойности на параметрите на режима на стерилизация в стерилизационната камера са изпълнени.

Допускат се разлики в интензитета на дълбочината на цвета на термоиндикаторния етикет на индикаторите, поради неравномерността на допустимите температурни стойности в различните зони на стерилизационната камера. Ако термоиндикаторният етикет на поне един индикатор напълно или частично запазва цвят, който лесно се различава от цвета на референтното състояние, това означава, че не се спазват необходимите стойности на параметрите на режима на стерилизация в стерилизационната камера.

Индикаторите и стандартите за сравнение трябва да съвпадат по партидни номера. Забранено е да се оценяват резултатите от контрола на стерилизацията с помощта на индикатори от различни партиди.

Оценката на съответствието на промяната на цвета на термоиндикаторния етикет в сравнение със стандарта се извършва при осветеност от най-малко 215 лукса, което съответства на матова лампа с нажежаема жичка от 40 W, от разстояние не повече над 25 см. За бактериологичен контрол понастоящем се използват биотестове, които имат дозирано количество спори от тестовата култура. Съществуващият метод дава възможност да се оцени ефективността на стерилизацията не по-рано от 48 часа, което не позволява използването на вече стерилизирани продукти до получаване на резултатите от бактериологичния контрол.
Биологичен индикатор е препарат от патогенни спорообразуващи микроорганизми, за които е известно, че са силно устойчиви на този тип процес на стерилизация. Целта на биологичните индикатори е да потвърдят способността на процеса на стерилизация да убива устойчиви микробни спори. Това е най-критичният и надежден тест на процеса на стерилизация. Биологичните индикатори се използват като контрол на натоварването: ако резултатът е положителен (растеж на микроби), тогава това натоварване не може да се използва и трябва да се извикат всички предишни зареждания до последния отрицателен резултат. За да се получи надежден биологичен отговор, трябва да се използват само онези биологични индикатори, които отговарят на международните стандарти EC 866 и ISO 11138/11135. При използване на биологични индикатори възникват известни затруднения - необходимост от микробиологична лаборатория, обучен персонал, продължителността на инкубацията многократно надвишава продължителността на стерилизацията, необходимостта от карантиниране (невъзможност за използване) на стерилизираните продукти до получаване на резултат. Поради горните трудности при прилагането на биологичния метод в извънболничната дентална практика, обикновено се използват физични и химични методи за контрол на ефективността на стерилизацията.

ОЦЕНКА НА ЕФЕКТИВНОСТТА НА ДЕЙСТВИЕТО НА АНТИСЕПТИЦИ И ДЕЗИНФЕКТАНТИ. ОПРЕДЕЛЯНЕ НА ЧУВСТВИТЕЛНОСТТА НА БАКТЕРИИТЕ КЪМ АНТИМИКРОБНИ ЛЕКАРСТВА

Въведение.Унищожаването на патогенните за човека микроби е един от най-важните проблеми в профилактиката и лечението на различни заболявания. За борба с микробите се използват методи на асептика, антисептика, дезинфекция и антимикробна терапия. Всеки метод има свои специфични цели и условия на приложение.

Тема 7.1. МЕТОДИ ЗА ОЦЕНКА НА АНТИМИКРОБНИЯ ЕФЕКТ НА ХИМИЧНИТЕ И ФИЗИЧНИТЕ ФАКТОРИ

Въведение.асептика -система от мерки, които предотвратяват въвеждането (навлизането) на микроорганизми от околната среда в тъканите или кухините на човешкото тяло по време на медицински и диагностични манипулации, както и в материала за изследване, в медии за култураи култури от микроорганизми в лабораторни изследвания. Асептиката осигурява спазването на специални санитарни и хигиенни правила и методи на работа, както и специална обработка на инструменти, материали, ръце на медицински работници, помещения и др. с цел частично (дезинфекция) или пълно (стерилизация) унищожаване на микроби.

Антисептици- комплекс от терапевтични и превантивни мерки, насочени към унищожаване на микроорганизми, които могат да причинят инфекциозен процес в увредени участъци от кожата и лигавиците, чрез третиране с микробицидни вещества - антисептици.

Стерилизация- пълно унищожаване на микроорганизми, включително вегетативни форми и спори. Различават се 3 основни групи методи за стерилизация: физични, механични и химични. Изборът на метод, използван за решаване на практически проблем, зависи от обекта, който ще се стерилизира.

Дезинфекция- дезинфекция на обекти от околната среда. За разлика от стерилизацията, дезинфекцията води до смъртта на повечето, но не всички, форми на микроби и по този начин осигурява само намаляване на микробното замърсяване (замърсяване), а не пълно обеззаразяване на обекта. Следователно обектите, които са били дезинфекцирани, не са абсолютно безопасни.

Планирайте

програма

1. Асептика, антисептика и дезинфекция. Антисептици и дезинфектанти.

2. Антимикробно действие на физични и химични фактори.

3. Методи за стерилизация; апарати, използвани за стерилизация.

4. Методи за контрол на ефективността на стерилизацията, действието на антисептиците и дезинфектантите.

Демонстрация

1. Апаратура, използвана при стерилизация: автоклав, пещ, апарат за филтриране и UV облъчване.

И Задачатастуденти

1. Вземете предвид резултатите от експериментите, проведени с бактериални тестови обекти, за да контролирате ефективността на стерилизацията, извършена чрез кипене и автоклавиране. За да направя извод.

2. Определете антибактериалния ефект на UV лъчите върху стафилококи и Escherichia coli, като използвате готови посеви.

3. Вземете предвид резултатите от експериментите, поставени за определяне на антимикробния ефект на антисептичните и дезинфекциращите вещества. За да направя извод.

Насоки

Методи за стерилизация

I. Физични методи.Излагане на високи температури. Високата температура има микробициден ефект поради способността да предизвиква денатурация на най-важните биополимери, предимно протеини.

Стерилизация чрез суха топлина в сушилно-стерилизиращ шкаф (пещи на Пастьор)се основава на бактерицидния ефект на въздуха, загрят до 165-170 ° C в продължение на 45 минути. При по-висока температура се получава овъгляване на памучни тампони, хартия, в която са опаковани съдовете, а при по-ниска е необходим дълъг период на стерилизация. Сухата топлина стерилизира стъклени изделия (Петриеви блюда, епруветки, пипети и др.).


Автоклавиране- Стерилизация с прегрята пара (при повишено налягане) в парен стерилизатор (автоклав). Един от най ефективни методистерилизация, която намира широко приложение не само в микробиологичната, но и в клиничната практика. Работата с автоклав изисква прецизно изпълнение специална инструкцияи спазване на правилата за безопасност. Максималната температура на парата се измерва със специален термометър, който се поставя в автоклава заедно с материала за стерилизация. В някои случаи се използват химикали с определена точка на топене: бензонафтол (PO °C), бензоена киселина (120 °C). Много хранителни среди, превръзки, бельо се стерилизират при налягане 1 atm за 15-20 минути, хранителни среди с въглехидрати при 0,5 atm за 15 минути, а дезинфекцията на заразения материал се извършва при 1,5-2 atm за 20 -25 минути (Таблица 7.1.1).

Таблица 7.1.1. Връзка между налягане, температура и продължителност на стерилизация в парен стерилизатор (автоклав)

0 100 30-60 (дробни) 0,5 111 20-30

1 121 15-20 1,5 127 15-20

Парна стерилизацияизвършва се в автоклав с отвинтен капак и отворен изходен кран. Този метод на стерилизация се основава на антибактериалния ефект на парата върху вегетативните клетки. Използва се в случаите, когато материалът за стерилизация не издържа на високи температури, като например хранителни среди с витамини, въглехидрати. За пълно обеззаразяване се използва принципът на фракционна стерилизация, т.е. материалът се стерилизира при 100 "C (или 80-90 ° C) за 20-30 минути в продължение на 3 дни подред. В този случай вегетативните клетки умират, а спорите остават и покълват за 1 ден. Последващо двойно нагряване осигурява достатъчно надеждна стерилност на материала.

Тиндализация -това е фракционна стерилизация на материали при 56-58 "C за 1 час 5-6 дни подред. Използва се за стерилизация на вещества, които лесно се разрушават при високи температури (кръвен серум, витамини и др.).

Запалване в пламъкаспиртна печка или газова горелка

Смяната е ограничена, например за стерилизация на бактериологични бримки, дисекционни игли, пинсети.

Излагане на йонизиращо лъчение. Микробицидният ефект на йонизиращото лъчение се основава на способността им да причиняват увреждане на ДНК молекулата. За стерилизация на медицински инструменти за еднократна употреба и бактериологично оборудване, чувствително към термични ефекти (пластмасови съдове за култивиране на микроби и клетъчни култури, пластмасови спринцовки, системи за кръвопреливане и др.), Обикновено се използва стерилизация чрез γ-лъчение.

I. Механични методи.Те се основават на филтриране през специални мембранни филтри с малък размер на порите, способни механично да задържат микроорганизми. Хартиените и полимерни филтри намират широко приложение в лабораторната практика. Има филтри с пори с различни, строго калибрирани размери, което ви позволява да гарантирате пречистването на материала не само от бактерии, но и от вируси и, ако е необходимо, от някои макромолекули. За стерилизация се използва филтриране течни материаликоито не издържат на топлина (кръвен серум, антимикробни разтвори, компоненти на хранителни среди за бактерии и клетъчни култури), за получаване на бактериални токсини и други отпадъчни продукти от бактерии. Филтрирането е водещ метод за стерилизация на въздуха, когато е необходимо. За да направите това, въздухът преминава през филтри, импрегнирани с микробициди. Такива системи за стерилизация се използват например в настолни кутии за работа с патогени на особено опасни инфекции, както и в операционни зали, родилни отделения и др.

III. Химични методи.Те се основават на третиране на обект с химикали, които имат микробициден ефект и са способни, при определени режими на експозиция, да осигурят пълното унищожаване на микрофлората. Химическата стерилизация обикновено се използва за обработка на различни устройства и инструменти за многократна употреба, които са чувствителни към високи температури (фиброоптични устройства, медицински импланти и др.). Стерилизиращите агенти включват етиленов оксид, водороден прекис, глутаралдехид, пероксиоцетна киселина, хлорен диоксид.

Независимо от метода, във всички случаи е необходимо редовно проследяване на ефективността на процедурата по стерилизация. За тази цел се използват биологични индикатори - известни микроорганизми, които са най-устойчиви на този метод на обработка (например спори Bacillus stearothermophilusза контрол на ефективността на автоклавирането, Bacillus subtilis- за контрол на стерилизация със суха топлина). Има и физико-химични индикатори – вещества, които претърпяват видим


моите промени (промяна на цвят, състояние на агрегиране и т.н.) само ако се спазва правилният режим на обработка.

Методи за дезинфекция

За дезинфекция се използват физични и химични методи.

I. Физични методи.Излагане на високи температури
обиколка.

кипене.Спринцовки, малки хирургически инструменти, предметни стъкла и покривни стъкла и някои други предмети се поставят в стерилизатори, в които се налива вода. За премахване на твърдостта и повишаване на точката на кипене към водата се добавя 1-2% разтвор на натриев бикарбонат. Варенето се извършва най-малко 30 минути. При варене някои вируси (например вирус на хепатит B) и бактериални спори остават жизнеспособни.

Пастьоризациявъз основа на антибактериалния ефект на температурата върху вегетативните клетки, но не и върху бактериалните спори. Материалът се нагрява при температура 50-65 "С за 5-10 минути, последвано от бързо охлаждане. Обикновено се пастьоризират напитки и хранителни продукти (вино, бира, сокове, мляко и др.).

Излагане на йонизиращо лъчение. ултравиолетова радиация(UV) с дължина на вълната 260-300 микрона има доста изразен микробициден ефект, но някои видове микроби и спори са устойчиви на UV. Поради това UV облъчването не е в състояние да осигури пълно унищожаване на микрофлората - стерилизация на обекта. UV обработката обикновено се използва за частична дезинфекция (дезинфекция) на големи обекти: повърхности на предмети, помещения, въздух в медицински заведения, микробиологични лаборатории и др.

Гама радиацияима изразен микробициден ефект върху повечето микроорганизми, включително вегетативни форми на бактерии и спори на повечето видове, гъбички, вируси. Използва се за стерилизиране на пластмасови съдове и медицински инструменти за еднократна употреба. Трябва да се има предвид, че лечението с гама лъчение не гарантира унищожаването на инфекциозни агенти като приони.

II. Химични методи.Това е обработка на дезинфекциран обект
tami - микробицидни химикали. някои
някои от тези съединения могат да имат токсични ефекти
върху човешкото тяло, така че се използват изключително
За обработка на външни обекти. Като дезинфектант
обикновено се използва водороден прекис, съдържащ хлор
единство (0,1-10% разтвор на белина, 0,5-5% разтвор
хлорамин, 0,1-10 % разтвор на две трети основна сол на хипо-

Калциев хлорат - DTSGK), формалдехид, феноли (3-5% разтвор на фенол, лизол или карболова киселина), йодофори. Изборът на дезинфектант и неговата концентрация зависят от материала, който ще се дезинфекцира. Дезинфекцията може да бъде достатъчна за обеззаразяване само на тези медицински инструменти, които не проникват през естествените бариери на тялото (ларингоскопи, цистоскопи, вентилатори). Някои вещества ( борна киселина, мертиолат, глицерин) се използват като консерванти за приготвяне на терапевтични и диагностични серуми, ваксини и други лекарства.

Антисептични методи

Като антисептици се използват само съединения с ниска токсичност за тялото, които имат антимикробен ефект. Най-често използван 70% етанол, 5% разтвор на йод, 0,1% разтвор на KMp0 4, 0,5-1% алкохолни разтвори на метиленово синьо или брилянтно зелено, 0,75-4,0% разтвор на хлорхексидин, 1-3% разтвор на хексахлорофен и някои други съединения. Антимикробни агенти също се добавят към материали, използвани в производството на превръзки, лейкопластири, зъбни протези, материали за пломбиране и други подобни. за да им придаде бактерицидни свойства.

Методи за контрол на ефективността на стерилизацията, действието на антисептиците и дезинфектантите. Изследване на антибактериалното действие на високите температури. Поставете копринени нишки, навлажнени със смес от спорообразуващи (3 епруветки) и неспорообразуващи (3 епруветки) култури в епруветки с хранителен бульон. Автоклавирайте или варете една епруветка с всяка култура; Не излагайте контролните тръби на никакъв удар. След обработката дръжте всички култури в термостат при 37 ° C за 24 часа.Отбележете резултата от експеримента и направете заключение.

Контрол на стерилността на превръзките и хирургическите инструменти. Тестовите проби (или тампони от повърхността на големи инструменти) се посяват върху три среди: захарен бульон, тиогликолова среда и течна среда на Сабуро. Културите се инкубират в термостат за 14 дни. При липса на растеж във всички култури, материалът се счита за стерилен.

Изследване на антибактериалното действие на UV лъчите. Суспензия от стафилококи или E.coliв изотоничен разтвор на натриев хлорид в обем от 1 ml, поставете на разстояние 10-20 cm от центъра на лампата. Инокулирайте облъчените и необлъчените (контролни) бактериални суспензии в хранителен бульон и инкубирайте


при 37 ° C за 16-24 часа, след което оценете резултатите: липсата на мътност на средата е свързана със смъртта на облъчената бактериална култура, мътността се отбелязва в контролата, което показва наличието на растеж.

Определяне на антимикробното действие на антисептици и дезинфектанти. 1. Подгответе два вида тестови обекти: а) копринени нишки, напоени с култура E.coli;б) копринени нишки, навлажнени със спорообразуваща култура (с високо съдържание на спори). Нишките се поставят в разтвори на фенол (5%), лизол (5%), белина (10%) за 5 и 60 минути, след това се измиват от изпитваните вещества, засяват се в хранителен бульон и се поставят в термостат до следващия ден . Контроли за действие химически веществане подлагайте. Отбележете резултата от експеримента и направете заключение.

2. Навлажнете филтърни хартиени дискове с разтвори на изпитваните вещества и поставете върху повърхността на хранителен агар в петриево блюдо, засено (с трева) с тестова култура от стафилококи или Escherichia coli. Инкубирайте съда за 24 часа при 37°C. За антибактериалното действие на изследваните вещества се съди по диаметъра на зоните на инхибиране на бактериалния растеж, образувани около дисковете.

Тема 7.2. МЕТОДИ ЗА ОЦЕНКА НА ЕФЕКТИВНОСТТА НА ДЕЙСТВИЕТО НА АНТИМИКРОБНИ ЛЕКАРСТВА

Въведение. Антимикробните средства (естествени и синтетични антибиотици) се използват за лечение на заболявания, причинени от микроорганизми. За ефективна терапия е необходимо да се избере лекарство, което има най-голяма активност по отношение на този инфекциозен агент и има най-малко вреданормална човешка микрофлора. Широкото разпространение на бактериални щамове с различна степен на резистентност към много лекарства (мултирезистентност) прави качествената (метод на диска) и количествената (метод на серийно разреждане) оценка на бактериалната чувствителност към терапевтични лекарства особено актуална.

▲ Програма

1. Спектри на действие на основните групи антимикробни лекарства.

2. Оценка на ефекта на антимикробните лекарства върху бактериите по метода на диска.

3. Определяне на минималната инхибиторна концентрация (MIC) на антимикробни лекарства по метода на серийните разреждания.

И.Демонстрация

1. Антимикробни средства от различни групи.

2. Стандартни хартиени дискове, импрегнирани с антимикробни агенти за определяне на чувствителността на бактериите към тях.

3. Таблици и схеми на антимикробните спектри на най-важните групи антибиотици и механизмите на тяхното антибактериално действие.

Задание на учениците

1. Направете експеримент за определяне на чувствителността на стафилококите към различни антибиотици, като използвате метода на диска.

2. Въз основа на резултатите от експеримента определете минималната инхибираща концентрация на пеницилин за различни бактериални култури чрез метода на серийни разреждания.

Насоки

Количествено определяне на чувствителността на бактериите към антимикробни лекарства чрез метода на серийни разреждания.Този метод се използва за определяне на минималната инхибиторна концентрация (MPC) - най-ниската концентрация на антибиотик, която напълно потиска растежа на изследваните бактерии. Приготвя се изходен разтвор на антибиотик, съдържащ лекарството в определена концентрация (μg / ml или U / ml) във физиологичен или буферен разтвор или в специален разтворител. Основният разтвор се използва за приготвяне на серийни (2-кратни) разреждания на антибиотика в хранителна среда - бульон (в обем 1 ml) или агар. От изследваната бактериална култура се приготвя суспензия със стандартна плътност и се инокулира в 0,1 ml върху среди с различни концентрации на антибиотика, както и върху среда без препарата (културен контрол). Културите се инкубират при 37°C за 20-24 часа или повече (за бавно растящи бактерии), след което резултатите от експеримента се отбелязват за помътняване на хранителния бульон или появата на видим растеж на бактерии върху агара, сравняват се с управлението.взето като IPC.


като MIC се приема най-високата концентрация на лекарството, която предотвратява развитието на CPP или натрупването на патогенни антигени в клетките.

Интерпретация на резултатите, т.е. оценка на клиничната чувствителност, извършена въз основа на критериите, дадени в табл. 7.2.1. Чувствителните щамове включват бактериални щамове, чийто растеж се инхибира при концентрации на лекарството, открити в кръвния серум на пациента, когато се използват средни терапевтични дози антибиотици. Умерено резистентните щамове включват щамове, чието потискане на растежа изисква концентрации, които се създават в кръвния серум, когато се прилагат максималните терапевтични дози от лекарството. Микроорганизмите са устойчиви, чийто растеж не се потиска от лекарството в концентрации, създадени в тялото при използване на максимално допустимите дози.

Таблица 7.2.1. Интерпретациярезултатите от определянето на чувствителността на бактериите към антибиотици чрез метода на серийни разреждания

Антибиотик MIC (mcg/ml)
Усещам- междинен стабилен-
тяло прецизен див лук
(С) (R)
Пеницилини
Бензилпеницилин:
за стафилококи £0,12 - >0,25
за други бактерии <1,5 >1,5
Оксацилин
за Стафилококус ауреус <2 - >4
за други видове стафилококи <0,25 - >0,5
Метицилин <2 - >4
Ампицилин:
за стафилококи <0,25 - >0,5
за E.coliи други ентеробактерии <8 >32
Карбеницилин:
за E.coliи други ентеробактерии <16 >64
за Pseudomonas aeruginosa <128 >512
Пиперацилин
за E.coliи други ентеробактерии <16 >64
за Pseudomonas aeruginosa >64 - >182
Азлоцилин <64 - >128
Цефалоспорини
Цефазолин <8 >32
Цефалотин <8 >32
Цефаклор <8 >32
Цефалексин <8 >32
Цефуроксим <8 >32

Продължение

междинен

Цефамандол <8 >32
Цефотаксим <8 16-32 >64
Цефтриаксон <8 16-32 >64
Цефоперазон <16 >64
Цефтазидим <8 >32
цефепим Нова бета версия <8 -лактамы >32
Имипенем <4 >16
Меропенем <4 >16
Хинолони
Налидиксова киселина SI6 - >32
Ципрофлоксацин <1 >4
Офлоксацин <2 >8
Норфлоксацин <4 юзиды >16
аминогли
Канамицин <16 >64
Гентамицин <4 >16
Тобрамицин <4 >16
Амикацин <16 >64
Нетилмицин <8 >32
Тетрациклини, макролиди, линкозамиди
Тетрациклин <2 4-8 >16
Доксициклин <4 >16
Еритромицин 50,5 1-4 >8
Азитромицин <2 >8
Кларитромицин <2 >8
Алеандомицин <2 >8
Линкомицин <2 >8
Клиндамицин <0,25 0,5 >1
Антибиотици от други групи
Хлорамфеникол (лъв омицетин) <8 >32
Фузидова киселина <2 4-8 >16
Рифампицин <2 >8
Полимиксин <50 ЕД/мл >50 U/ml
Ванкомицин <4 8-16 S32
Фурадонин <32 >128

Микротест системи за определяне на чувствителността към антимикробни лекарства.Системите за микротест са предназначени за бързо определяне на клиничната чувствителност към антибиотици на бактерии от определени видове или сродни групи. Тестваните лекарства в стандартни концентрации се намират в ямките на готови пластмасови плаки. Определя се чувствителността на изследваната култура към две концентрации на всеки антибиотик: средна терапевтична и максимална. Материалът от изолирана колония се въвежда в 5 ml стандартна хранителна среда, съдържаща индикатор, с помощта на измервателна бактериологична примка (обем 1 μl) и се приготвя суспензия. Приготвената бактериална суспензия се излива в ямките на таблетката с 0,1 ml и се инкубира при оптимални за този вид бактерии условия на температура и газов състав на средата. Растежът на бактериите се оценява по промяната в цвета на индикатора, което може значително да намали времето за изследване. Ако бактериите останат жизнеспособни в присъствието на антибиотик, освобождаването на метаболитни продукти води до промяна в цвета на индикатора. Липсата на промяна на цвета показва пълното потискане на жизнената активност на микроба. Резултатите се определят след 4 часа инкубация с помощта на спектрофотометър.

Определяне на клиничната чувствителност на бактериите към антимикробни лекарства по метода на диска (дифузионен тест). Методът се основава на потискане на бактериалния растеж върху плътна хранителна среда под действието на антибиотик, съдържащ се в хартиен диск. В резултат на дифузията на лекарството в агара се образува концентрационен градиент на антибиотика около диска. Размерът на зоната на инхибиране на растежа зависи от чувствителността на бактерията и свойствата на лекарството (по-специално от скоростта на дифузия в агара). За определяне на чувствителността в клиничната практика се използват готови стандартни дискове със строго определено съдържание на антибиотици. Съдържанието на лекарството се определя въз основа на терапевтичните концентрации на всеки антибиотик и средните стойности на MIC за патогенни бактерии. На всеки диск е посочено наименованието на лекарството и неговото количество. За определяне на чувствителността се приготвя суспензия, съдържаща стандартен брой жизнеспособни клетки от изследваната бактериална култура и се посява с трева в петриеви панички (диаметър 100 mm) върху среда на Muller-Hinton или AGV (специална среда, която не пречи на дифузията на антимикробни вещества и нямат негативен ефект върху тях). Дискове се нанасят върху засятата повърхност с помощта на апликатор на разстояние 2,5 cm от центъра на съда в кръг (фиг. 7.2.1). На чашата се поставят не повече от 5 диска. Културите се инкубират в продължение на 18-20 часа при 35 ° С. Ако процедурата е извършена правилно, на фона на равномерна бактериална морава около дисковете,


Зони на инхибиране на растежа, имащи кръгла форма. Отчитането на резултатите се извършва чрез измерване на диаметъра на зоната на инхибиране на растежа. За площта, която ще се измерва, вземете зоната, в която напълно липсва растеж на бактерии. Интерпретацията на получените резултати (заключението за чувствителността) се извършва въз основа на критериите, дадени в табл. 7.2.2.

Таблица 7.2.2. Тълкуване на резултатите от определяне на чувствителността на бактериите към антибиотици по метода на диска (на AGV среда)

Пеницилини

Бензилпеницилин:
при изследване на стафилококи £20 21- -28 >29
при изследване на други бактерии £10 11- -16 £17
Ампицилин:
при изследване на стафилококи <20 21- -28 £29
при грам-отрицателен тест
бактерии и ентерококи <9 10- -13 >14
Карбеницилин (25 mcg) £14 15- -18 >19
Карбеницилин (100 mcg) при
тест P. Aeruginosa £11 12- -14 £15
Метицилин £13 14- -18 >19
Оксацилин (10 mcg) $15 16- -19 £20
Азлоцилин (за P.aeruginosa) £13 14- -16 £16
Пиперацилин (за P.aeruginosa) <17 >18
Азтреонам <15 16- -21 £22

Цефалоспорини


Продължение

Антибиотик Диаметър закърнели зони
(mm)
Усещам- междинен стабилен-
тяло прецизен див лук
(С) (R)
Нови бета лактами
Имипенем*<13 14-15 >16
Меропенем*<13 14-15 >16
Хинолони
Ципрофлоксацин<15 16-20 >21
Офлоксацин<12 13-16 >17
Налидиксинова киселина*<12 13-17 >18
Аминогликозиди
Стрептомицин<16 17-19 >20
Канамицин<14 15-18 >19
Гентамицин £15 - >16
сизомицин<15 - >16
Тобрамицин<14 - >15
Амикацин<14 15-16 >17
Нетилмицин<12 13-14 >15
Тетрациклини, макролиди, линкозамиди
Тетрациклин<16 17-20 >22
Доксициклин<15 16-19 >20
Еритромицин<17 18-21 >22
Азитромицин<13 14-17 >18
Рокситромицин*<14 15-18 >19
Кларитромицин* £13 14-17 >18
Линкомицин<19 20-23 £24
Клиндамицин £14 15-20 >21
Олеандомицин £16 17-20 >21
Антибиотици от други групи
Хлорамфеникол<15 16-18 >19
Фузидова киселина<16 17-20 >21
Рифампицин<12 13-15 >16
Полимиксин<11 12-14 >15
Ванкомицин:
за стафилококи<11 - >12
за ентерококи<14 15-16 >17
Ристомицин<9 10-11 >12
Фурадонин £15 16-18 >19
Фурагин £15 16-18 >19

*Предварителни данни.


Използването на дисковия метод има редица ограничения. Методът е подходящ само за определяне на чувствителността на бързорастящи бактерии, които образуват хомогенна морава в рамките на 24 часа върху стандартна плътна хранителна среда с доста прост състав (Muller-Hinton или AGW), която не съдържа вещества, които могат да намалят активността на антибиотици или предотвратяване на тяхното разпространение. В противен случай получената информация ще бъде неточна.

По този начин дисковият метод не може да се използва за определяне на чувствителността към антибиотици на всички бавнорастящи и най-претенциозни бактерии, които включват много човешки патогени. (Mycobacterium spp., Helicobacter spp., Bacteroides spp., Prevotella spp., Brucella spp., Mycoplasma spp.и много други). При определяне на чувствителността на някои придирчиви бактерии, за които са разработени стандартни тестове (Haemophilus spp., Neisseria spp.,някои видове стрептококи), специални хранителни среди и допълнителни критерии трябва да се използват при тълкуване на резултатите.

Дисковият метод също не дава надеждни резултати при определяне на чувствителността на бактериите към препарати, които дифундират слабо в агар, например полипептидни антибиотици (полимиксин, ристомицин).

Количествено определяне на чувствителността на бактериите към антимикробни лекарства с помощта на Е-тест.Е-тестът е вариант на дифузионния метод, който ви позволява да определите MIC на антибиотик. Вместо дискове се използват стандартни полимерни ленти, изготвени по специална технология (AB BIODISK) и съдържащи имобилизирани антимикробни агенти, нанесени под формата на непрекъснат концентрационен градиент. От другата страна на лентата

Таблица 7.2.3. Определяне на MIC на антимикробни средства по метода на серийни разреждания


Е-тестът има скала от IPC стойности. Когато лентата се постави върху повърхността на агара, процесът на контролирана дифузия гарантира, че в хранителната среда около лентата се създава стабилен концентрационен градиент на лекарството, съответстващ на скалата. Процедурата за определяне на чувствителността с помощта на E-тест се извършва подобно на тестването по метода на диска. След инкубацията на семето около лентата се образува елипсовидна зона на инхибиране на растежа. IPC стойността съответства на пресечната точка на елиптичната зона с Е-тест лентата. За интерпретиране на резултатите (оценка на клиничната чувствителност) се използват стандартни критерии (Таблица 7.2.3).

ЕКОЛОГИЯ НА МИКРООРГАНИЗМИТЕ

Въведение.Екологията на микроорганизмите е дял от общата микробиология и изучава взаимоотношенията на микро- и макроорганизмите, живеещи заедно в определени биотопи. В естествените местообитания (почва, вода, въздух, живи организми) микробите са част от различни биоценози. Екологията на микробите, които причиняват човешки заболявания, се определя от способността им да оцеляват във външната среда, да променят гостоприемниците и да се задържат в организма на гостоприемника на фона на действие. имунна система, а също така е свързано с методите на тяхното разпространение, предаване и редица други фактори. Оценката на редица условия на околната среда е една от основните задачи на санитарната микробиология.

В основата са санитарно-бактериологични изследвания практическа работасанитарни лекари и епидемиолози при санитарно-хигиенната оценка на обекти на околната среда, хранителни продукти, напитки и др. и играят водеща роля в превенцията на инфекциозните заболявания. Важен обект на изследване в медицинската микробиология е нормалната микрофлора на човешкото тяло, която включва микроби, които живеят върху кожата, лигавиците на различни органи (устна кухина, фаринкс, назофаринкс, горни дихателни пътища, черва, особено дебелото черво, и т.н.). Някои от тях са постоянен (задължен)обитатели на човешкото тяло, други - временно (незадължително или преходно).Нормалната микрофлора е жизненоважна система на тялото, която осигурява защита срещу много патогенни микроби, съзряване и стимулиране на имунната система, производството на редица витамини и ензими, участващи в храносмилането и др.

Качественият и количественият състав на човешката микрофлора се променя през целия живот и зависи от пола, възрастта, диетата и др. В допълнение, колебанията в състава на човешката микрофлора могат да се дължат на появата на заболявания и употребата на лекарства, предимно антибиотици и имуномодулатори . Оценката на качествения и количествения състав на микрофлората на човешкото тяло по определени показатели позволява да се идентифицират нейните нарушения (дисбактериоза) и свързаните с нея последствия.

Тема 8.1. МИКРОФЛОРА НА ВОДАТА, ВЪЗДУХА И ПОЧВАТА. МЕТОДИ ЗА САНИТАРНО-БАКТЕРИОЛОГИЧНО ИЗСЛЕДВАНЕ НА ВОДА, ВЪЗДУХ И ПОЧВА

g Програма

1. Микрофлора на вода, въздух и почва.

2. Санитарнопоказателни микроорганизми и тяхното значение.

3. Методи за определяне на if-индекс, if-титър и микробно число на водата.

4. Методи за определяне на микробното число на въздуха.

5. Методи за определяне на перфрингенс титър, коли титър и микробно число в почвата.

ИДемонстрация

1. Санитарно и бактериологично изследване на водата по метода на мембранните филтри.

2. Санитарно-бактериологично изследване на въздуха. Апаратът на Кротов. Растеж на микроорганизми върху MPA в петриево блюдо. Растеж на хемолитични стрептококи върху кръвен агар.

3. Санитарно и бактериологично изследване на почвата. Растеж Протей вулгарис(по Шукевич).

аЗадание на учениците

1. Да се ​​оцени санитарното и бактериологичното състояние на водата въз основа на резултатите от определяне на микробния брой, коли-индекс и коли-титър.

2. Да се ​​оцени санитарното и бактериологичното състояние на въздуха въз основа на резултатите от определянето на микробния брой.

3. Да се ​​оцени санитарното и бактериологичното състояние на почвата въз основа на резултатите от определяне на микробния брой, коли-титър, perfringens-титър и титър на термофилни бактерии.


4. Инокулирайте измиване от кожата на ръцете върху глюкозо-пептонна среда.

▲ Насоки

Микробиологични методи за изследване на околната среда

За оценка на санитарно-хигиенното състояние на различни обекти на околната среда, вода, храна и др., Извършват се санитарни и бактериологични изследвания, чиято цел е да се определи епидемичната опасност. Директното откриване на патогенни микроби обаче е свързано с редица трудности, главно поради ниската концентрация на тези микроби, които по правило не могат да се размножават във въздуха, водата и почвата. Затова в санитарната и микробиологичната практика се използват индиректни методи, базирани на определяне на общото микробно замърсяване на един или друг обект и на откриване на т.нар. санитарно-показателни бактерии(Таблица 8.1.1).

Таблица 8.1.1. Санитарно-показателни бактерии на околната среда и храните

Предмет Характер на замърсяването Санитарно показателни бактерии
вода фекален Бактерии от групата на Escherichia coli Escherichia coli, Citrobacter freundii, Enterobacter aerogenes, Enterococcus faecalis
Почвата Също Същите бактерии и клостридии (Clostridium perfringens, CI. sporogenesи т.н.)
Индустриален-ежедневен- термофилни бактерии, Протей
вие (разлагащ се боклук) вулгарис
храна фекален
продукти ключалки S. faecalis, P. vulgaris
Капково вливане през устата Стафилококус ауреус
Предмети фекален Бактерии от групата на чревния тракт
ежедневието ключалки, P. vulgaris, E. faecalis
Капково вливане през устата S. aureus
Въздух Също S. aureus, S. pyogenes
вода, Индустриален Производствени щамове на микро-
почвата, халати
въздух

Санитарно-показателни микроби, показващи фекално замърсяванесреда, са бактериите от групата на Escherichia coli (CGB). Те принадлежат към различни родове на семейството Enterobacteriaceae.Диференциално-диагностичните признаци на БГКП са представени в табл. 8.1.2. Откриването на E. coli във всякакви екологични или хранителни продукти се счита за най-надеждният индикатор за прясно фекално замърсяване. Наличие на бактерии Citrobacterи Enterobacterпоказва относително старо фекално замърсяване. Наличието на Clostridium perfringens, C. sporogens и други клостридии в почвата показва нейното фекално замърсяване, както прясно, така и старо, тъй като тези бактерии образуват спори, което им позволява да се задържат в околната среда (по-специално в почвата) за дълго време. Откриване в обекти на околната среда Ентерококус фекалиссъщо показва тяхното фекално замърсяване. Групата на термофилните бактерии включва несвързани бактерии, представители на различни семейства, които могат да се размножават при температура от 60 ° C и по-висока. (Lactobacillus lactis, Streptococcus thermophilusи т.н.). Те не са постоянни обитатели на човешките черва и не служат като критерии за фекално замърсяване на околната среда. Рязкото увеличаване на броя на тези бактерии може да показва замърсяване на почвата с разлагащи се отпадъци, тъй като те се размножават в самозагряващ се тор и компост.


Таблица 8.1.2. Диференциално диагностични признаци на БГКП

ЕшерихияСмесете + - +

коликиселини

CitrobacterСъщото + - p + +

freundii

EnterobacterБутан - - + - + +

аерогенидиол

Символи: (+) - положителна реакция, (-) - отрицателна реакция, p - различни реакции.

Бактерии, принадлежащи към род Протей (P.vulgaris)и др.) семейства Enterobacteriaceae,широко разпространени в природата. Тези гнилостни бактерии в големи количестванамерени върху разлагащи се останки от животни и растения. Откриването на тези бактерии във всяка храна показва гнилостно разпадане.

Хемолитични стрептококи (S.pyogenes),като транзитни жители на назофаринкса и фаринкса, те се екскретират с капчици слуз чрез въздушни капчици. Условията за оцеляване на хемолитичните стрептококи в околната среда практически не се различават от условията, характерни за повечето други патогени на въздушно-капкови инфекции. Откриването на хемолитични стрептококи във въздуха на закрито показва възможното му замърсяване с микроби, съдържащи се във фаринкса, назофаринкса, горните дихателни пътища на човек и които са причинители на въздушно-капкови инфекции. Стафилококус ауреусе незадължителен обитател на назофаринкса, фаринкса, а също кожатачовек. Наличието му във въздуха на помещенията или върху предмети, разположени там, е индикатор замърсяване по въздуха.Едновременното откриване на Staphylococcus aureus и хемолитични стрептококи показва висока степен на замърсяване на въздуха.

Санитарно-бактериологично изследване на водата

Определяне на микробното число на водата. Водата от чешмата се инокулира в обем 1 ml, вода от открити водоеми - в обеми 1,0; 0,1 и 0,01 мл. Всички проби се поставят в стерилни петриеви панички, след което се заливат с 10-12 ml разтопен и охладен до 45-50°C хранителен агар, който внимателно се изпарява.

Старателно се смесва с вода. Културите се инкубират при 37 °C за 1-2 дни. Вода от открити резервоари се инокулира паралелно върху две серии чаши, едната от които се инкубира при 37 °C за 1 ден, а другата за 2 дни при 20 °C. След това се преброява и изчислява броят на колониите, израснали на повърхността и в дълбочината на средата микробно число на водата- броя на микроорганизмите в 1 мл.

Определяне на if-титър и if-индекс на вода. Коли-титървода - минималното количество вода (ml), в което се откриват CGB. Коли-индекс- количеството на БГКП в 1 литър вода. Тези показатели се определят чрез метода на титруване (ферментация) или метода на мембранните филтри.

Метод на титруване. Различни обеми вода се инокулират в глюкозо-пептонна среда (1% пептонна вода, 0,5% разтвор на глюкоза, 0,5% разтвор на натриев хлорид, индикатор Andrede и поплавък), а за инокулиране на големи количества (100 и 10 ml) използва се концентрирана среда, съдържаща 10 пъти повече от тези вещества.

Водата на откритите повърхностни водоеми се изследва в обеми от 100; 10; 1,0 и 0,1 мл. За изследване чешмяна воданаправете култури от три обема от 100 ml, три обема от 10 ml и три обема от 1 ml. Инокулациите се инкубират в продължение на 1 ден при 37°C. За ферментацията се съди по наличието на газови мехурчета в поплавъка. Ферментирали или мътни проби се култивират върху среда Endo. От порасналите колонии се правят натривки, оцветяват се по Грам и се прави оксидазен тест за разграничаване на бактериите от родовете Escherichia, Citrobacterи Enterobacterот грам-отрицателни бактерии от семейство Pseudomonadaceae и други оксидаза-положителни бактерии, живеещи във вода. За тази цел 2-3 изолирани колонии се отстраняват от повърхността на средата със стъклена пръчка, нанесена с удар върху филтърна хартия, навлажнена с ди-метил-р-фенилендиамин. При отрицателен оксидазен тест цветът на хартията не се променя, при положителен - става син в рамките на 1 минута. Грам-отрицателните пръчици, които не образуват оксидаза, отново се изследват във ферментационен тест - въвеждат се в полутечен хранителен агар с 0,5 % разтвор на глюкоза и се инкубира при 37 °C за 1 ден. При положителен резултатопределете дали титъра и дали индекса според статистическата таблица. 8.1.3.

Метод на мембранен филтър. Мембранен филтър № 3 се поставя във фуния на Seitz, монтирана в колба на Бунзен, която е свързана с вакуумна помпа. Мембранните филтри се стерилизират предварително чрез изваряване в дестилирана вода. Филтрира се вода от водопроводната мрежа и вода от артезиански кладенци в обем 333 мл. чиста водаот отворен резервоар се филтрира в обем от 100, 10, 1,0 и 0,1 ml, по-замърсеният преди филтриране се разрежда със стерилен


Таблица 8.1.3. Определяне на индекса на бактерии от групата Escherichia coli при изследване на вода

Коли-титър

от 3 обема по 100 мл

вода. След това филтрите се поставят върху повърхността на средата Endo в петриеви панички и след инкубиране при 37°C за 1 ден се преброява броят на израсналите колонии, типични за CGB. Приготвят се натривки от 2-3 червени колонии, оцветяват се по метода на Грам и се определя оксидазната активност. За да направите това, филтърът с бактериални колонии, отглеждани върху него, се прехвърля с пинсети, без да се обръща, върху кръг от филтърна хартия, навлажнен с диметил-р-фенилендиамин. При наличие на оксидаза индикаторът оцветява колонията в синьо. 2-3 колонии, които не са променили първоначалния си цвят, се инокулират в полутечна среда с 0,5% разтвор на глюкоза. Културите се инкубират в продължение на 24 часа при 37°С. При наличие на образуване на газ се преброява броя на червените колонии върху филтъра и се определя коли индекса. Нормативни показатели за пия водаса дадени в табл. 8.1.4.

Таблица 8.1.4. Стандарти за питейна вода (GOST 2874-82)

стандартен

Индекс

Броят на микробите в 1 ml вода не повече от 100

Броят на бактериите от групата на Escherichia coli в 1 литър вода 3

(if-index), не повече

За определяне на титъра Ентерококус фекалиспригответе 10-кратни разреждания на вода. Цялата вода и нейните разреждания в обем от 1 ml се инокулират в една от течните елективни среди (KF, поли-

Myxinovaya и др.), инкубирани при 37 ° С в продължение на 2 дни, след 24 и 48 часа, се правят посевки върху плътни елективно-диференциални среди: KF агар, TTX агар (среда с трифенилтетразолиев хлорид), полимиксинтелурит агар. Идентифицират се стрептококи. според вида на колониите, клетъчната морфология и оцветяването по метода на Грам. Върху среда с ТТХ стрептококите образуват тъмночервени колонии, върху агар с телурит - черни.

Съставът на медиите. KF среда: 2% хранителен агар, 1% екстракт от дрожди, 2% лактоза, 0,4% натриев азид, 0,06% натриев карбонат, бромкрезолов червен индикатор.

Полимиксинова среда: 2% хранителен агар, 1% екстракт от дрожди, 1% глюкоза, полимиксин М 200 единици/ml, индикатор бромтимолово синьо.

Полимиксинтелурит агар: 2% хранителен агар, 1% екстракт от дрожди, 1% глюкоза, кристално виолетово 1:800 000, полимиксин М 200 U/ml, 0,01% калиев телурит.

Трифенилтетразолиев хлорид агар (TTC): 2% хранителен агар, 1% екстракт от дрожди, 1% глюкоза, кристално виолетово 1:800 000, 0,01% TTC.

При дефиниране на индекс E.faecalisизползвайте статистическите таблици, използвани за установяване на коли индекса. Освен това за тази цел се използва методът на мембранния филтър. За откриване на патогенни бактерии водата преминава през мембранни филтри, които след това се поставят в течна елективна среда или върху повърхността на плътна среда за диференциална диагностика.

Санитарно-бактериологично изследване на въздуха

Определяне на микробното число на въздуха.Количествените микробиологични методи за изследване на въздуха се основават на принципите на утаяване (утаяване), аспирация или филтрация.

седиментационен метод. Две петриеви панички с хранителен агар се оставят отворени за 60 минути, след което посевите се инкубират в термостат при 37 ° C. Резултатите се оценяват по общия брой на колониите, отгледани на двете блюда: ако има по-малко от 250 колонии, въздухът се счита за чист; 250-500 колонии показват средно замърсяване, като броят на колониите над 500 е замърсен.

метод на аспирация. Това е по-точен количествен метод за определяне на микробното число на въздуха. Въздушното засяване се извършва с помощта на устройства. Апаратът на Кротов (фиг. 8.1.1) е проектиран по такъв начин, че въздухът се засмуква с определена скорост през тесен процеп на плоча от плексиглас, който затваря петриевото блюдо с хранителен агар.


Фиг.8.1.1. Апарат Кротов за бактериологични изследвания

В същото време аерозолните частици със съдържащите се върху тях микроорганизми са равномерно фиксирани върху цялата повърхност на средата поради постоянното въртене на чашата под входния процеп. След инкубиране на сеитбата в термостат, микробният брой се изчислява по формулата:

а х 1000 x~y

където a е броят на колониите, израснали върху блюдото; V е обемът на въздуха, преминал през устройството, dm 3; 1000 - стандартен въздушен обем, dm 3.

При определяне на микробния брой на въздуха се използва хранителен агар за изолиране на хемолитични стрептококи - кръвен агар с добавяне на генциан виолет, последвано от контролна микроскопия и селективна субкултура на подозрителни колонии върху кръвен агар.

Съставът на медиите.Кръвен агар от тинтява виолет: 2% хранителен агар, 5-10% дефибринирана кръв от кон, заек или овен, тинтява виолет (1:50 000).

Жълтъчно-солев агар (YSA): 2% хранителен агар, 10% натриев хлорид, 20 % (по обем) жълтъчна суспензия (1 яйчен жълтък на 200 ml изотоничен разтвор на натриев хлорид).

Други устройства също могат да се използват за изследване на въздуха (Дяков, Речменски, Киктенко, PAB-1 - вземане на проби -


Ник аерозолен бактериологичен, POV-1 - устройство за вземане на проби от въздух), с помощта на което определен обем въздух преминава през течности или филтри, след което се правят измерени култури върху хранителни среди. Използването на PAB-1 и POV-1 дава възможност за изследване на големи обеми въздух и откриване на патогенни бактерии и вируси.

При изследване на въздуха на болници (хирургични, акушерско-гинекологични и др.) Директно се изолират патогенни и условно патогенни бактерии - патогени на нозокомиални инфекции (стафилококи, Pseudomonas aeruginosa и др.). В случай на нозокомиални инфекции на стафилококова етиология се провеждат изследвания, насочени към идентифициране на източниците и пътищата на разпространение на инфекциите: чрез фаготипиране се определя идентичността на стафилококите, изолирани от обекти на околната среда, както и от пациенти и придружители. Стандартни показатели за микробно число и съдържание Стафилококус ауреус,

  • Глава 2. Държавна социална помощ, предоставена под формата на предоставяне на набор от социални услуги на гражданите 17 страница
  • Глава 2. Държавна социална помощ, предоставена под формата на предоставяне на набор от социални услуги на гражданите 18 страница

  • Запалване на огън.Това е надежден метод за стерилизация, но има ограничена употреба поради разваляне на артикулите. Бактериологичните бримки се стерилизират по този начин.

    Суха стерилизациятоплина. Извършва се в пещ на Пастьор (суха------

    сух шкаф) при температура 160-170°C за 1 час. Този метод стерилизира лабораторна стъклария, пипети, увити в хартия, епруветки, затворени с памучни тапи. При температури над 170 ° C започва карбонизация на хартия, памучна вата и марля.

    Парна стерилизация под налягане (автоклавиране).Най-универсалният метод за стерилизация. Извършва се в автоклав - водно-парен стерилизатор. Принципът на действие на автоклава се основава на зависимостта на температурата на кипене на водата от налягането.

    Автоклавът е двустенен метален котел с херметически затворен капак. На дъното на автоклава се налива вода, стерилизираните предмети се поставят в работната камера, капакът се затваря, първо без да се завинтва херметически. Включете котлона и оставете водата да заври. Получената пара измества въздуха от работната камера, който излиза през отворения изходен кран. Когато целият въздух е изпуснат и от крана излиза непрекъсната струя пара, кранът е затворен, капакът е херметически затворен. Парата се довежда до желаното налягане под контрола на манометър. Температурата на парата зависи от налягането: при нормално атмосферно налягане стрелката на манометъра е на 0 atm. - температура на парата 100°С, при 0,5 атм. - 112°С, при 1 атм. -121°С, при 1,5 атм. - 127°С, при 2 атм. - 134°С. В края на стерилизацията изключете автоклава, изчакайте, докато налягането намалее, постепенно изпускайте пара и отворете капака. Обикновено при налягане от 1 атм. в рамките на 20-40 минути стерилизирайте прости хранителни среди и разтвори, които не съдържат протеини и въглехидрати, превръзки, бельо. Материалите за стерилизация трябва да са паропропускливи. При стерилизиране на материали в големи обеми (хирургически материали) времето се увеличава до 2 часа. При налягане 2 атм. произвеждат дезинфекция на патологичен материал и отпадъчни култури от микроби.

    Хранителните среди, съдържащи захари, не могат да бъдат стерилизирани при 1 atm, тъй като те се карамелизират, така че се подлагат на фракционна стерилизация с течаща пара или автоклав при 0,5 atm.

    За контрол на стерилизационния режим се използват биологични и физични методи. Биологичният метод се основава на факта, че едновременно със стерилизирания материал се поставят спори на Bacillus stearothermophilus, които умират при 121°C за 15 минути. След стерилизация спорите не трябва да растат върху хранителна среда. Физическият метод се основава на използването на вещества с определена точка на топене, например сяра (119 ° C), бензоена киселина (120 ° C). Запечатани епруветки, съдържащи веществото, смесено със сухо багрило (магента), се поставят в автоклав заедно с материала за стерилизация. Ако температурата в автоклава е достатъчна, веществото ще се стопи и ще промени цвета на багрилото.

    Стерилизираща течностпара_се извършва в апарат на Кох или в автоклав с отвинтен капак и отворен изходен кран. Водата в апарата се загрява до 100°C. Получената пара преминава през положения материал и го стерилизира. Еднократно третиране при 100°C не убива спорите. Затова се използва метод на фракционна стерилизация - 3 дни подред за 30 минути, между които се оставя за един ден на стайна температура. Нагряването при 100°C предизвиква термично активиране на спорите, в резултат на което те покълват до следващия ден във вегетативни форми и умират при второто и третото нагряване. В резултат на това само хранителни среди могат да бъдат стерилизирани с течаща пара, т.к За покълването на спорите са необходими хранителни вещества.

    За материали, които се разпадат при 100 ° C (например серум, хранителна среда, съдържаща протеин), се използва друг тип фракционна стерилизация - тиндализация.Материалът за стерилизация се нагрява на водна баня при 56-60°С в продължение на 5-6 дни подред - първия ден по 2 часа, през останалите дни по 1 час.

    Стерилизация чрез облъчване

    UV лъчи.Лампи ултравиолетова радиацияизползва се за дезинфекция на въздуха в лечебни заведения, бактериологични боксове и лаборатории, както и за стерилизиране на течности с помощта на специални устройства.

    Стерилизация чрез йонизиращо лъчениеразлични предмети са изложени в медицинската и микробиологичната индустрия: лекарства, превръзки, коприна, хирургически ръкавици, спринцовки за еднократна употреба, пластмасови тръби за интравенозно приложение и много други материали.

    Приложение йонизиращо лъчениеима няколко предимства пред термичната стерилизация. При стерилизация с йонизиращо лъчение температурата на стерилизирания обект леко се повишава, поради което такива методи се наричат ​​студена стерилизация. При стерилизация в голям мащаб може да се създаде конвейер. Материалите се стерилизират в пакетирана форма. Има два вида оборудване за облъчване - гама кобалт-60 и ускорители на електрони.

    Стерилизация - (лат. sterilis - обезраждане) или пълно унищожаване на микроорганизми и техните спори чрез излагане както на физични фактори, така и на химикали.

    В момента е в сила индустриалният стандарт (OST 42-21-2-85), който определя методите, средствата и режимите на стерилизация и дезинфекция на медицински изделия, който е допълнен със заповед № 408 и „Методически указания за дезинфекция, предстерилизационно почистване и стерилизация на медицински изделия" , одобрен от M3 на Русия на 30 декември 1998 г. № M U-287-113.

    Всички продукти в контакт с повърхността на раната, в контакт с кръв или инжекционни лекарства, както и някои видове медицински инструменти, които влизат в контакт с лигавиците по време на работа и могат да причинят увреждане на тях, се подлагат на стерилизация.

    Методи за стерилизация

    Има термични методи - физически: пара, въздух, гласперлени (в среда на нагрети топки), както и ултравиолетово облъчване на въздуха в помещенията: съблекални, процедурни, операционни зали. . В клиничната практика най-често се използват термични методи за стерилизация, които се състоят в излагане на пара при свръхналягане и температура на стерилизация (автоклавиране) и излагане на сух горещ въздух, достигащ температурата на стерилизация (използват се сухи пещи с различни модификации).

    Химичните методи на стерилизация се извършват с разтвори на дезинфектанти или газове от полиетиленови продукти, оборудване за изкуствена белодробна вентилация (ALV), различни ендоскопи с фиброоптика. Химичният метод включва газова стерилизация с етиленов оксид, пропиленов оксид, метилбромид и тяхната смес, както и пароформалдехиден метод.

    Ултразвуков метод за стерилизация. Стерилизация чрез инфрачервено лъчение. Радиационен метод в (инсталация с радиационен източник за промишлена стерилизация на изделия за еднократна употреба). Изборът на метод зависи от много фактори, основните от които са:

    1. Материалът, от който е направен продуктът.

    2. Дизайн на продукта.

    3. Условията за стерилност на продукта.

    4. Ефективност на метода

    Автоклав (от гръцки auto - себе си и латински clavis - ключ) - означава "самозаключващ се". Автоклавирането или стерилизацията в парен стерилизатор се използва за процеса на стерилизация на инструменти, всякакви медицински изделия от метал, стъкло, гума и текстил, разтвори, лигатурен конец.

    Режими на стерилизация

    1 режим - температура 132 °C, налягане 2 atm., време 20 min. Първият режим (основен) е предназначен за стерилизация на продукти от груб калико, марля (превързочен материал, бельо и др.), Стъкло, включително спринцовки с надпис "200 'C", продукти от устойчив на корозия метал.

    2-ри режим - температура 120 °C, налягане 1.1 atm., време 45 мин. Вторият режим (щадящ) се препоръчва за продукти от тънък каучук, латекс (хирургически ръкавици и др.) и определени видовеполимери (полиетилен с висока плътност).

    3-ти режим - температура 134°C - 5 мин., 2 атм.

    Метод на въздушна стерилизация

    Извършва се във въздушен стерилизатор със сух горещ въздух. Препоръчва се за стерилизация на всякакви медицински изделия от метал, стъкло, силиконова гума.

    Режими на стерилизация

    1 режим - температура 180 °C, време 60 мин. Първият режим (основен) е предназначен за стерилизация на стъклени продукти, включително спринцовки с надпис "200 ° C", метални продукти: хирургически, стоматологични, гинекологични инструменти, включително устойчиви на корозия метали.

    2-ри режим - температура 160 °C, време 150 мин. Вторият режим (нежен) е предназначен за стерилизация на продукти от силиконова гума, както и части от някои устройства и устройства.

    Стерилизация с химически разтвори Водородният прекис има изразени дезинфекционни свойства. За стерилизация се използва 6% разтвор на водороден прекис - експозиция 180 минути, температура 50 ° C; при пълно потапяне за стерилизация на изделия от полимери, каучук, стъкло и устойчиви на корозия метали експозиция - 360 мин. при температура 18 "С. (период на стерилност - три дни)

    Стерилизация с газове Стерилизацията се извършва в стационарен газов стерилизатор. OST препоръчва извършването на газова стерилизация на редица медицински изделия с етиленов оксид или ОВ смес. На стерилизация се подлагат оптика, пейсмейкъри, продукти от полимерни материали, гума, стъкло, метал, пластмасови части от различни устройства. Практическото прилагане на този метод среща значителни трудности, така че газовата стерилизация все още не е получила разпространението, което заслужава по отношение на своите възможности.

    Стерилизацията е пълно освобождаване на обекти от околната среда от вегетативни и латентни форми на микроорганизми чрез използване на физични или химични фактори.

    Антисептици - набор от терапевтични и превантивни мерки, насочени към унищожаване на микроорганизми в рана, друга патологична формация или тялото като цяло.

    Асептиката е комплекс от терапевтични и превантивни мерки, насочени към предотвратяване на въвеждането на инфекциозни агенти в раната, тъканите, органите, телесните кухини на пациента по време на всякакви медицински (включително диагностични) манипулации.

    Стерилизацията се извършва с цел: 1) предотвратяване навлизането на микроорганизми в човешкото тяло по време на медицински интервенции; 2) изключване на микробно замърсяване на медицински и диагностични материали, хранителни среди и клетъчни култури, използвани при микробиологични и имунологични изследвания.

    Стъпки на стерилизация

    Стерилизирането на медицинските изделия включва три етапа: 1) дезинфекция; 2) предстерилизационно почистване и 3) самата стерилизация. Всички продукти подлежат на дезинфекция след употреба при пациенти.

    Дезинфекцията на продуктите се извършва с цел унищожаване на патогенни и опортюнистични микроорганизми, включително патогени на вирусен хепатит и HIV инфекция, Mycobacterium tuberculosis и гъбички, включително рода Candida. След дезинфекция продуктите се измиват с вода, изсушават се и се използват по предназначение или се подлагат на предстерилизиращо почистване и стерилизация.

    Извършва се предстерилизационно почистване с цел отстраняване на протеини, мазнини и механични замърсители, както и остатъци от лекарства.

    Стерилизацията на продуктите се извършва с цел унищожаване на микроорганизми от всякакъв вид, включително спорови форми. На стерилизация подлежат всички медицински продукти, които влизат в контакт с повърхността на раната, лигавиците с риск от увреждане на тях, както и в контакт с кръв или инжекционни лекарства.

      Дезинфекция на медицински изделия.

    Дезинфекцията на медицински изделия се извършва чрез физични и химични методи. Изборът на метод зависи от характеристиките на продукта, материалите, използвани при производството на продуктите, и тяхното предназначение.

    Метод на физическа дезинфекциявключва кипене, излагане на наситена водна пара или сух горещ въздух.

    Варенето на инструментите се извършва в дестилирана вода в продължение на 30 минути от момента на кипене или във вода с добавяне на 2% разтвор на сода за хляб (натриев бикарбонат) в продължение на 15 минути от момента на кипене. Този вид дезинфекция се използва за изделия от стъкло, метали, топлоустойчиви полимерни материали и каучук. Преди варене продуктите се почистват от органични замърсители чрез изплакване с чешмяна вода или разтвор на дезинфектанти, които нямат фиксиращ ефект в специални контейнери (при спазване на мерките за безопасност при работа с биологичен материал). Водата за измиване се дезинфекцира допълнително.

    Методът с пара, използващ наситена водна пара под свръхналягане, дезинфекцира стъкло, метал, гума, латекс, топлоустойчиви полимерни материали. Поставят се в стерилизационни кутии (биксове) и се поставят в парен стерилизатор (автоклав). Автоклавирането се извършва при 110°C за 20 минути. Не се изисква предварително почистване на продуктите от органични замърсители.

    Въздушният метод дезинфекцира продукти от стъкло, метали, силиконова гума в отворена формавърху рафтовете на въздушен стерилизатор (сушилня) при температура 120С за 45 минути. В този случай е необходимо задължително предварително почистване на продуктите от органични замърсители.

    Физическият метод за дезинфекция на медицински изделия е прост, екологичен и безопасен за персонала.

    Метод за химическа дезинфекциявключва използването на разтвори на химикали-дезинфектанти, при което медицинските изделия се потапят веднага след употребата им при пациенти. Предварителните продукти се почистват от органични замърсители, за да се избегне намаляване на ефективността на работните разтвори. Разглобяемите продукти се дезинфекцират в разглобена форма, каналите и кухините на продуктите трябва да бъдат запълнени с дезинфекционен разтвор. Продуктите, които не са в пряк контакт с пациента, могат да бъдат обеззаразени чрез двукратно избърсване с кърпа, навлажнена с дезинфекционен разтвор.

    За химичен методдезинфекцията използва вещества, които имат вирусоциден ефект срещу патогени на вирусен хепатит и HIV инфекция ( Alaminol, Javel, Lysoformin-3000, PVC, Комбидезинфектант на инструменти и др.), а в противотуберкулозните организации - вещества с микобактерицидно действие ( Sidex, Septodor, Chloramine B, Javelion ). Дезинфекцията се извършва по препоръчаните за тези инфекции режими. Дезинфектанти, които нямат тези свойства, не трябва да се използват за обеззаразяване на медицински изделия.

    Хлорсъдържащите вещества, както и повечето продукти на основата на водороден прекис, са предназначени за продукти, изработени от устойчиви на корозия метали, гуми, пластмаси и стъкло. Използването на етилов алкохол се препоръчва само за дезинфекция на метални изделия след предварителното им почистване от органични съединения. Продуктите, съдържащи алдехид, се препоръчват за продукти от стъкло, метали, полимерни материали, включително термолабилни. Водородният пероксид може да се използва за дезинфекция на медицински изделия.

    За да се предотврати развитието на резистентност на микроорганизмите към дезинфектанти, се препоръчва седмична смяна на химически дезинфектанти, които са част от различна група лекарства за активното вещество.

    След приключване на дезинфекцията медицинските изделия се измиват с течаща вода, механично почистванетехните къдрици, четки, салфетки, след което се използват по предназначение или се преминава към следващия етап на стерилизация - предстерилизационно почистване.